วิตามินดีเป็นวิตามินชนิดหนึ่งและยังเป็นฮอร์โมนสเตียรอยด์อีกด้วย ส่วนใหญ่ได้แก่ VD2 และ VD3 ซึ่งมีโครงสร้างคล้ายกันมาก วิตามิน D3 และ D2 จะถูกแปลงเป็นไฮดรอกซิลวิตามินดี 25 ชนิด (รวมถึงวิตามินดี 3 และดี 25-ไดไฮดรอกซิล 25-ไดไฮดรอกซิลด้วย) 25-(OH) VD ในร่างกายมนุษย์ โครงสร้างที่มั่นคง มีความเข้มข้นสูง 25-(OH) VD สะท้อนถึงปริมาณวิตามินดีทั้งหมด และความสามารถในการแปลงของวิตามินดี ดังนั้น 25-(OH)VD จึงถือเป็นตัวบ่งชี้ที่ดีที่สุดในการประเมินระดับวิตามินดี ชุดวินิจฉัยจะขึ้นอยู่กับ อิมมูโนโครมาโทกราฟีและสามารถให้ผลได้ภายใน 15 นาที