วิตามินดีเป็นวิตามินและยังเป็นฮอร์โมนสเตียรอยด์ส่วนใหญ่รวมถึง VD2 และ VD3 ซึ่งมีโครงสร้างคล้ายกันมาก วิตามิน D3 และ D2 ถูกแปลงเป็น 25 ไฮดรอกซิลวิตามินดี (รวมถึง 25-dihydroxyl vitamin D3 และ D2) 25- (OH) VD ในร่างกายมนุษย์, โครงสร้างที่มั่นคง, ความเข้มข้นสูง 25- (OH) VD สะท้อนให้เห็นถึงปริมาณทั้งหมดของวิตามินดีและความสามารถในการแปลงของวิตามินดีดังนั้น 25- (OH) VD จึงถือเป็นตัวบ่งชี้ที่ดีที่สุดสำหรับการประเมินระดับของวิตามินดี Immunochromatography และสามารถให้ผลลัพธ์ภายใน 15 นาที