เป็นส่วนหนึ่งของการควบคุมต่อมไทรอยด์จากมุมมองทางสรีรวิทยา thyroxine (T4) มีผลกระทบต่อการเผาผลาญทั่วไป Thyroxine (T4) ถูกปล่อยออกสู่การไหลเวียนโลหิตอย่างอิสระส่วนใหญ่ (99%) ผูกพันกับโปรตีนในพลาสมาซึ่งเรียกว่าสถานะที่ถูกผูกไว้ นอกจากนี้ยังมีจำนวน T4 ที่ไม่ได้ผูกกับโปรตีนในพลาสมาซึ่งเรียกว่า Free State (FT4) Free thyroxine (FT4) หมายถึง Free State thyroxine ในซีรั่ม ฟรี thyroxine (FT4) ยังสามารถสะท้อนการทำงานของต่อมไทรอยด์ในลักษณะที่ค่อนข้างแม่นยำในกรณีที่มีการเปลี่ยนแปลงในแรงผูกพันและความเข้มข้นของโปรตีนที่มีผลต่อ thyroxine ในพลาสมาดังนั้นการทดสอบของ thyroxine อิสระก็เป็นปัจจัยสำคัญในการวินิจฉัยทางคลินิกตามปกติ ในกรณีที่มีความผิดปกติของต่อมไทรอยด์ที่น่าสงสัย FT4 จะถูกตรวจสอบด้วย TSH การทดสอบ FT4 ยังใช้กับการตรวจสอบการบำบัดแบบยับยั้ง thyroxine การทดสอบ FT4 มีความแข็งแรงของการเป็นอิสระจากการเปลี่ยนแปลงของความเข้มข้นและคุณสมบัติการผูกมัดของโปรตีนที่มีผลผูกพัน