NAČELO

Membrana testne naprave je na testnem območju prevlečena z antigenom rotavirusa skupine A, na kontrolnem območju pa s kozjim protitelesom proti zajčjemu IgG. Nalepke so predhodno prevlečene s fluorescentno označenim protitelesom proti rotavirusu skupine A in zajčjemu IgG. Pri pozitivnem testiranju vzorca se RV v vzorcu združi s fluorescentno označenim protitelesom proti rotavirusu skupine A in tvori imunsko mešanico. Pod vplivom imunokromatografije kompleks teče v smeri vpojnega papirja. Ko kompleks preide testno območje, se združi s prevleko proti protitelesu proti rotavirusu skupine A in tvori nov kompleks. Če je rezultat negativen, v vzorcu ni antigena rotavirusa skupine A, zato se imunski kompleksi ne morejo tvoriti, v območju zaznavanja (T) pa ni rdeče črte. Ne glede na to, ali je v vzorcu prisoten rotavirus skupine A, se z lateksom označen mišji IgG kromatografira na območju kontrole kakovosti (C) in ga zajamejo kozja protitelesa proti mišjemu IgG. V območju kontrole kakovosti (C) se pojavi rdeča črta. Rdeča črta je standard, ki se pojavi v območju kontrole kakovosti (C) za presojo, ali je vzorcev dovolj in ali je postopek kromatografije normalen. Uporablja se tudi kot standard interne kontrole reagentov.

Postopek testiranja:

1. Simptomatske bolnike je treba zbrati. Po poročilih se največje izločanje rotavirusa v blatu pri bolnikih z gastroenteritisom pojavi 3–5 dni po začetku bolezni in 3–13 dni po začetku simptomov. Če se vzorec odvzame dolgo po driski, število antigenov morda ne bo zadostovalo za pojav pozitivne reakcije.

2. Vzorce je treba zbrati v čisti, suhi in vodoodporni posodi, ki ne vsebuje detergentov in konzervansov.

3. Pri bolnikih brez driske vzorec blata ne sme biti manjši od 1-2 gramov. Pri bolnikih z drisko, če je blato tekoče, zberite vsaj 1-2 ml tekočega blata. Če blato vsebuje veliko krvi in sluzi, vzorec zberite ponovno.

4. Priporočljivo je, da vzorce testirate takoj po odvzemu, sicer jih je treba poslati v laboratorij v 6 urah in shraniti pri temperaturi 2–8 °C. Če vzorci niso bili testirani v 72 urah, jih je treba shraniti pri temperaturi pod –15 °C.

5. Za testiranje uporabite sveže blato in vzorce blata, pomešane z razredčilom ali destilirano vodo.