PRINCÍPIO

A membrana do dispositivo de teste é revestida com antígeno do Rotavírus do Grupo A na região de teste e com anticorpo IgG anti-coelho de cabra na região de controle. A almofada de marcação é previamente revestida com anticorpo anti-Rotavírus do Grupo A e IgG de coelho marcados com fluorescência. Ao testar uma amostra positiva, o Rotavírus presente na amostra se combina com o anticorpo anti-Rotavírus do Grupo A marcado com fluorescência, formando um complexo imune. Sob a ação da imunocromatografia, o complexo flui na direção do papel absorvente. Ao passar pela região de teste, o complexo se combina com o anticorpo anti-Rotavírus do Grupo A presente na membrana, formando um novo complexo. Se o resultado for negativo, não há antígeno do Rotavírus do Grupo A na amostra, portanto, não há formação de complexos imunes e, consequentemente, não haverá linha vermelha na área de detecção (T). Independentemente da presença do Rotavírus do Grupo A na amostra, o IgG de camundongo marcado com látex é cromatografado na área de controle de qualidade (C) e capturado pelo anticorpo IgG anti-camundongo de cabra. Uma linha vermelha aparecerá na área de controle de qualidade (C). A linha vermelha é o padrão que aparece na área de controle de qualidade (C) para avaliar se há amostras suficientes e se o processo cromatográfico está ocorrendo normalmente. Ela também é usada como padrão de controle interno para reagentes.

Procedimento de teste:

1. A coleta de amostras deve ser feita em pacientes sintomáticos. De acordo com relatos, a excreção máxima de rotavírus nas fezes de pacientes com gastroenterite ocorre de 3 a 5 dias após o início da doença e de 3 a 13 dias após o início dos sintomas. Se a amostra for coletada muito tempo após o início da diarreia, a quantidade de antígenos pode não ser suficiente para causar uma reação positiva.

2. As amostras devem ser coletadas em um recipiente limpo, seco e impermeável, que não contenha detergentes nem conservantes.

3. Para pacientes sem diarreia, as amostras de fezes coletadas não devem ser inferiores a 1-2 gramas. Para pacientes com diarreia, se as fezes forem líquidas, colete pelo menos 1-2 ml de líquido fecal. Se as fezes contiverem muito sangue e muco, colete uma nova amostra.

4. Recomenda-se testar as amostras imediatamente após a coleta; caso contrário, elas devem ser enviadas ao laboratório em até 6 horas e armazenadas entre 2 e 8 °C. Se as amostras não forem testadas em até 72 horas, devem ser armazenadas a uma temperatura inferior a -15 °C.

5. Utilize fezes frescas para os testes, e as amostras de fezes devem ser misturadas com diluente ou água destilada.