Como parte do ciclo de regulação da glândula tireoide do ponto de vista fisiológico, a tiroxina (T4) tem impacto no metabolismo geral. A tiroxina (T4) é liberada livremente na circulação sanguínea, a maior parte dela (99%) se liga às proteínas plasmáticas, o que é chamado de estado ligado. Há também vestígios de T4 não ligados às proteínas no plasma, que é chamado de estado livre (FT4). Tiroxina livre (FT4) refere-se à tiroxina em estado livre no soro. A tiroxina livre (FT4) também pode refletir a função tireoidiana de maneira relativamente precisa em caso de alterações na força de ligação e na concentração da proteína de ligação à tiroxina no plasma, portanto, o ensaio da tiroxina livre também é um fator importante no diagnóstico clínico de rotina. Em caso de suspeita de distúrbios da tireoide, o T4L deve ser dosado com TSH. O ensaio FT4 também é aplicável ao monitoramento da terapia supressora de tiroxina. O ensaio FT4 tem a força de ser independente de alterações na concentração e nas propriedades de ligação da proteína de ligação.