Witamina D jest witaminą i jest także hormonem steroidowym, w tym głównie VD2 i VD3, których struktura jest bardzo podobna. Witamina D3 i D2 są przekształcane na 25 witaminy hydroksylowej D (w tym 25-dihydroksylowa witamina D3 i D2). 25- (OH) VD W ludzkim ciele, stabilna struktura, wysokie stężenie. 25- (OH) VD odzwierciedla całkowitą ilość witaminy D, a zdolność konwersji witaminy D, więc 25- (OH) VD jest uważany za najlepszy wskaźnik oceny poziomu witaminy D. Zestaw diagnostyczny oparty jest na zestawie diagnostycznym Immunochromatografia i może dać wynik w ciągu 15 minut.