शारीरिक दृष्टिकोणबाट थाइरोइड ग्रन्थि नियमन लूपको एक भागको रूपमा, थाइरोक्सिन (T4) ले सामान्य चयापचयमा प्रभाव पार्छ। थाइरोक्सिन (T4) रक्त परिसंचरणमा स्वतन्त्र रूपमा रिलिज हुन्छ, यसको अधिकांश (99%) प्लाज्मामा प्रोटीनसँग बाँधिन्छ, जसलाई बाउन्ड स्टेट भनिन्छ। प्लाज्मामा प्रोटीनसँग अनबाउन्ड T4 को ट्रेस मात्रा पनि छ, जसलाई फ्री स्टेट (FT4) भनिन्छ। फ्री थाइरोक्सिन (FT4) ले सीरममा फ्री स्टेट थाइरोक्सिनलाई जनाउँछ। प्लाज्मामा थाइरोक्सिन-बाइन्डिङ प्रोटीनको बाइन्डिङ बल र सांद्रतामा परिवर्तन भएको अवस्थामा फ्री थाइरोक्सिन (FT4) ले थाइरोइड प्रकार्यलाई अपेक्षाकृत सही तरिकाले प्रतिबिम्बित गर्न सक्छ, त्यसैले फ्री थाइरोक्सिनको परख पनि नियमित क्लिनिकल निदानमा एक महत्त्वपूर्ण कारक हो। शंकास्पद थाइरोइड विकारहरूको अवस्थामा, FT4 को TSH सँग परख गरिनेछ। FT4 परख थाइरोक्सिन दमनकारी थेरापीको निगरानीमा पनि लागू हुन्छ। FT4 परखमा बाइन्डिङ प्रोटीनको सांद्रता र बाइन्डिङ गुणहरूमा परिवर्तनहरूबाट स्वतन्त्र हुने शक्ति छ।