Vitamin D adalah vitamin dan juga hormon steroid, terutamanya termasuk VD2 dan VD3, yang merupakan strucinya sangat serupa. Vitamin D3 dan D2 ditukar kepada 25 hidroksil vitamin D (termasuk 25-dihydroxyl vitamin D3 dan D2). 25- (OH) VD dalam tubuh manusia, struktur stabil, kepekatan tinggi. 25- (OH) VD mencerminkan jumlah vitamin D, dan keupayaan penukaran vitamin D, jadi 25- (OH) VD dianggap sebagai penunjuk terbaik untuk menilai tahap vitamin D. Kit diagnostik adalah berdasarkan pada Immunochromatography dan boleh memberikan hasil dalam masa 15 minit.