Com a part del bucle de la regulació de les glàndules de la tiroides des de la perspectiva fisiològica, la tiroxina (T4) té impactes en el metabolisme general. La tiroxina (T4) s’allibera a la circulació sanguínia lliurement, la major part (99%) s’enllaça amb proteïnes en plasma, que s’anomena estat lligat. També hi ha traces de T4 sense volar amb proteïnes al plasma, que es diu Free State (FT4). La tiroxina gratuïta (FT4) es refereix a la tiroxina de l'estat lliure en sèrum. La tiroxina lliure (FT4) també pot reflectir la funció de la tiroides de manera relativament precisa en cas de canvis en la força d’unió i la concentració de proteïna que uneix la tiroxina en plasma, per tant, l’assaig de tiroxina lliure és també un factor important en el diagnòstic clínic de rutina. En cas de presumptes trastorns de la tiroides, FT4 serà analitzat amb TSH. L’assaig FT4 també s’aplica al control de la teràpia supressiva de la tiroxina. L’assaig FT4 té la força d’ésser independent dels canvis en la concentració i les propietats d’unió de la proteïna d’unió.