فيتامين د هو فيتامين وهرمون ستيرويدي، ويتكون أساسًا من فيتامين د2 وفيتامين د3، اللذين يتشابهان في التركيب. يتحول فيتامين د3 وفيتامين د2 إلى 25-هيدروكسي فيتامين د (بما في ذلك 25-ثنائي هيدروكسي فيتامين د3 وفيتامين د2). يتميز 25-(OH)VD في جسم الإنسان بتركيب مستقر وتركيز عالٍ. يعكس 25-(OH)VD إجمالي كمية فيتامين د وقدرة الجسم على تحويله، لذا يُعتبر أفضل مؤشر لتقييم مستوى فيتامين د. تعتمد مجموعة التشخيص على تقنية الكروماتوغرافيا المناعية، ويمكنها إعطاء النتيجة في غضون 15 دقيقة.